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牛血清白蛋白(BSA)在体外诊断试剂中的3个核心作用

2025-11-17

BSA可以说是IVD领域中最基础、最重要、应用最广泛的蛋白质之一,它是一种多功能的水溶性辅助试剂。 

 BSA的核心作用可以概括为:封闭、稳定和载体。


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这是BSA最经典的应用。 

 在固相免疫分析中,塑料微孔板或硝酸纤维素膜表面除了能特异性捕获目标抗原外,还会像胶水一样非特异性地吸附其他蛋白质。 

 这样会导致背景信号升高,信噪比下降,检测的灵敏度和准确性受损。 

 解决方案是在加入抗体或样本前,先用1%-5%的BSA溶液浸泡固相载体。 

 BSA分子会抢占地盘,覆盖住这些非特异性结合位点,从而为后续的特异性反应创造一个干净的背景。


许多诊断试剂的核心成分(如酶、抗体)是蛋白质,它们在体外环境中非常脆弱。 

 液体的气-液界面、容器管壁的吸附、反复冻融、高温等都会导致蛋白变性、聚集或失活。 

 解决方案是让BSA作为一种牺牲剂,让BSA优先被吸附或变性,从而保护核心活性成分。 

 此外,在高稀释度的溶液中,BSA提供了足够的蛋白浓度,减少了核心蛋白因浓度过低而失活的风险。 

 因此,在酶联免疫(ELISA)的酶标抗体稀释液、PCR体系中的酶保护剂以及冻干试剂中,BSA都是不可或缺的稳定成分。



在制备校准曲线时,需要将微量的目标分析物配制成不同浓度。 

 如果将这些小分子直接溶解在缓冲液中,它们极易吸附在容器内壁,导致浓度不准,且自身不稳定。 

 解决方案是将分析物溶解在含有0.1%-1% BSA的基质中。 

 BSA模拟了人体血清的蛋白环境,有效减少了容器吸附,确保了校准品在货架期内的浓度稳定,从而保证了整个检测系统的定量准确性。


BSA使用注意事项      

  1.来源与纯度:BSA的纯度至关重要。 

 不同纯度BSA(如Fraction V, 脂肪酸游离型, 球蛋白游离型)适用于不同场景。低纯度的BSA可能含有杂质(如IgG、蛋白酶),会引入背景干扰或降解试剂。 

 2.批间差:作为生物来源产品,不同生产批次的BSA在性能上可能存在差异。对于关键试剂的大规模生产,需要进行严格的批间检验。 

 3.潜在交叉反应:虽然经过纯化,但BSA中仍可能残留微量的牛IgG等成分。如果检测体系中含有抗牛IgG的二抗或类风湿因子,则可能引起假阳性信号。 

 4.动物源性风险:从生物安全角度考虑,BSA来源于牛,存在理论上的动物病原体污染风险。对于某些严格监管的领域,可能需要使用重组人血清白蛋白 作为替代。 

 5.浓度优化:BSA的使用浓度需要优化。浓度过低效果不佳;浓度过高可能造成浪费,甚至在某些情况下会空间阻碍特异性结合。


总的来说,牛血清白蛋白是体外诊断试剂配方中重要的物料之一。 

 BSA通过封闭作用,奠定了高灵敏度、高特异性免疫检测的基础;通过稳定作用,保障了试剂的核心活性和长效保质期;通过载体作用,确保了定量检测结果的准确性和可靠性。



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